科技 | 浙江大學顧臻團隊開發(fā)可口服的血糖響應性智能胰島素

　　糖尿病影響著全球超5億人的生活質量和生命健康。其中，對于1型糖尿病患者以及進展期2型糖尿病患者，外源性胰島素的補充是必要的治療手段。

　　然而，現有的胰島素制劑通常經皮下注射給藥，吸收后進入外周血液循環(huán)，到達脂肪、肌肉組織及肝臟起效。胰島素的治療指數窄，疊加外周體循環(huán)起效特點，導致胰島素給藥后患者低血糖頻發(fā)，嚴重時會危及生命。因此，改變胰島素給藥方式，優(yōu)化其外周起效的特點，能夠提高胰島素治療的安全性及有效性，對于胰島素治療具有重要意義。

　　2024年9月2日，浙江大學藥學院、金華研究院和先進藥物遞釋系統全國重點實驗室顧臻教授、王金強研究員團隊(博士研究生季康凡為第一作者)在 Nature Nanotechnology 期刊發(fā)表了題為：An orally administered glucose-responsive polymeric complex for high-efficiency and safe delivery of insulin in mice and pigs 的研究論文。

　　該研究開發(fā)出一種可口服糖響應膠束制劑，可經胃腸道遞送胰島素至體內。膠束可在胃腸道中保護負載的胰島素，減少其突釋及降解，增強胰島素的胃腸道吸收率，并在肝臟形成血糖響應的胰島素儲庫;儲庫可依據血糖高低實時調整胰島素速率，將適量胰島素釋放至肝臟，再進入外周循環(huán)。在1型糖尿病的小鼠和豬模型中，該制劑可以實現一天的血糖控制效果，且無低血糖發(fā)生的癥狀。

　　人體胰臟中胰島的β細胞能實時感知血糖變化，并依據血糖水平動態(tài)調控胰島素分泌速率。分泌的胰島素由肝門靜脈進入肝臟，結合肝臟實質細胞的胰島素受體，發(fā)揮降糖作用;未與之結合的胰島素進入體循環(huán)，達到肌肉和脂肪組織，發(fā)揮外周降糖作用。這一由肝臟到外周組織逐漸降低的胰島素濃度梯度，保障了肝臟器官在降糖中的核心作用，使得人體能夠高效安全地控制血糖水平。

　　通常而言，口服藥物具有肝臟首過效應，經過肝門靜脈進入肝臟后再進行分布，因此口服胰島素制劑可以模擬內源性胰島素的分布過程，將胰島素首先遞送至肝臟，隨后再進入外周組織。此外，進一步構建口服型葡萄糖響應性胰島素，模擬β細胞的胰島素動態(tài)智能分泌模式，可增強胰島素治療的安全性和有效性。然而，胃腸道的極端酸性環(huán)境、酶的降解作用、以及粘液和腸上皮細胞所構成的屏障，均是實現糖響應胰島素制劑高效口服的重要障礙。

　　在這項最新研究中，研究團隊合成了一種兩親性的兩嵌段聚合物(命名為PPF)，其親水端為兩性離子型聚甜菜堿，疏水端為4-羧基-3-氟苯硼酸(FPBA)修飾的聚2-氨基乙基甲基丙烯酸酯。膠束制劑由PPF與胰島素-鋅離子六聚體通過靜電相互作用和疏水相互作用自組裝形成，其流體力學尺寸約50 nm。該膠束可顯著緩解胰島素在胃腸道中的突釋并減少酶降解。獨特的蠕蟲狀結構、較小的粒徑以及兩性離子表面，促進胰島素在腸道內高效吸收，并通過肝門靜脈進入肝臟，在肝臟形成糖響應的胰島素儲庫。

　　圖1、糖響應性胰島素膠束制劑的形成及糖響應釋放胰島素示意圖

　　在正常血糖條件下，聚合物與胰島素-鋅離子六聚體之間形成了緊密的相互作用，這種作用使得胰島素得以緩慢而穩(wěn)定地釋放，從而有效維持基礎血糖的穩(wěn)定。然而，在高血糖狀態(tài)下，葡萄糖會與FPBA迅速結合形成苯硼酸酯鍵，從而降低聚合物疏水端的正電荷密度及疏水性，刺激胰島素快速釋放，調節(jié)血糖恢復正常水平。值得注意的是，由于該制劑首先將胰島素釋放至肝臟組織，可以形成從肝臟到外周組織逐漸降低的濃度梯度，因此可顯著減少低血糖事件的發(fā)生。

　　圖2、糖響應性胰島素膠束的肝臟靶向聚集和清除

　　在向小鼠灌胃Cy5熒光標記的膠束后，可于小鼠腹部清晰觀察到熒光分布，且該熒光強度隨時間推移逐步減弱，直至36小時后完全消退。進一步對小鼠離體器官進行成像分析，結果顯示膠束特異性地聚集于肝臟區(qū)域，而在其它器官則未觀察到明顯的熒光信號。

　　圖3、a, b，糖尿病小鼠在口服糖響應制劑后，腹腔注射葡萄糖耐量實驗中的血糖變化和血漿胰島素水平變化情況。c，小鼠血糖鉗夾實驗中，為維持正常血糖狀態(tài)和高血糖狀態(tài)，不同給藥組別所需的葡萄糖輸注速率

　　在鏈脲佐菌素誘導的1型糖尿病小鼠模型中，給予口服糖響應制劑3小時后，通過腹腔注射1.5 g/kg葡萄糖，觀察到糖尿病小鼠展現出接近健康小鼠的葡萄糖清除效率，且其血漿胰島素濃度較注射前提升了2.6倍。在隨后的血糖鉗夾實驗中，健康小鼠在口服糖響應制劑或皮下注射甘精胰島素后，為維持血糖于100 mg/dl，口服制劑組所需的葡萄糖輸注量僅為甘精胰島素組的6%。而對于糖尿病小鼠，為維持其血糖在400 mg/dl，口服制劑組所需的葡萄糖輸注量卻達到甘精胰島素組的60%。這10倍的輸糖量差異提示，高血糖環(huán)境可以顯著增強口服制劑對血糖的調控能力。進一步證明了該制劑具備體內糖響應胰島素釋放能力。

　　圖4、a，糖尿病小鼠在連續(xù)七日接受口服糖響應制劑治療后的血糖變化情況(藍色箭頭表示食物的供給，紅色箭頭表示口服糖響應制劑灌胃，黑色箭頭表示PBS灌胃)。b，糖尿病小豬口服糖響應膠束膠囊后的血糖變化情況。c，糖尿病小豬在治療后的一天內，低血糖、正常血糖和高血糖狀態(tài)的持續(xù)時間

　　在自發(fā)1型糖尿病小鼠模型中，連續(xù)七天每日口服一次該劑型，可以有效控制小鼠的餐后血糖，并持續(xù)維持正常血糖，顯示該制劑具備連續(xù)有效控糖的能力。在鏈脲佐菌素誘導的1型糖尿病小豬模型中，每日一次飼喂膠束膠囊，同樣能夠有效控制空腹血糖長達一天。其中，口服膠束膠囊能夠維持正常血糖狀態(tài)達10小時，且在此過程中未觀察到低血糖情況。相比之下，皮下注射的甘精胰島素則會導致糖尿病小豬出現平均約3.2小時的低血糖。

　　另外，該制劑具有較高的生物相容性。實驗結果顯示，接受治療的小鼠與正常對照組小鼠在血液生化指標、脂質水平及血液學評估上均無顯著性差異。對小鼠的主要器官，進行H&E和Masson染色檢測，均未發(fā)現明顯的毒性反應。同時，在小鼠肝臟及腸道組織中，對相關炎癥因子的免疫熒光染色分析結果，排除了該制劑引發(fā)急性或慢性炎癥反應的可能。

　　總的來說，該研究開發(fā)的血糖響應性胰島素智能口服制劑顯著提升了胰島素給藥的便捷性，一次口服可維持一天的基礎血糖穩(wěn)定，并有效控制餐后血糖波動。這為減輕糖尿病患者的用藥負擔，提出了一種便捷、安全的治療方案。

　　來源：生物世界